生物顯微鏡油鏡的鏡頭很小。當光線通過載玻片和油透鏡之間的空氣時，由于介質密度不同而發生折射或全反射，減少了入射到透鏡中的光線，使圖像顯得不清晰。如果在油鏡和載玻片之間加入類似玻璃折射率(n=1.52)的香脂油(n=1.515)，進入生物顯微鏡鏡頭的光線會增加，視野的亮度會增強，物體圖像會明亮清晰。

由于細菌體積小，在細菌的形態學研究中，往往需要用顯微鏡和油鏡才能觀察清楚。因此，需要熟練掌握油鏡的使用和保護規律。

（一）油鏡的識別:

每個物鏡的放大率可以通過其形狀來識別。鏡頭長度越長，鏡頭直徑越小，放大率越大。相反，放大倍數很小。顯微鏡油性鏡片的長度比低焦度和高焦度鏡片長，鏡片下緣一般刻有一圈黑線或白線，上面寫著100X、1.25或oil。

（二）油鏡的使用:

1、準備工作:

使用顯微鏡油鏡時，顯微鏡要直立在臺面上，不得彎曲顯微鏡的手臂傾斜臺面，以免灑出香柏油，影響觀察，污染臺面。

2、瞄準光線:

當顯微鏡使用自然光作為光源時，應該使用平面鏡。如果使用人工照明，使用凹面鏡。先打開光圈，轉動反射鏡，使光線集中在集光器上。您可以上下移動集光器，并根據需要縮放光圈以獲得亮度。通常，當用低功率鏡或高功率鏡觀察圖像或用油鏡檢查未染色的樣品時，有必要降低顯微鏡集光器并適當縮小孔徑以減弱光度。如果用油鏡檢查染色樣本，光度應該很強。顯微鏡的亮度開關應設置為亮，光圈應完全打開，集光器應上升至與載物臺齊平。

3、焦點調整:

a、將試件放在載物臺上，用推樣器固定，在物鏡下移動待檢零件。先用顯微鏡低倍鏡找出標本的位置，然后抬起鏡筒，在被檢部位滴一滴鏡油，然后換鏡油觀察。

b、轉動粗調器，使載物臺緩慢上升(或使鏡筒逐漸下降)，直至油透鏡浸入油中。此時，眼睛應從側面觀察，避免壓碎標本，損傷晶狀體。

c、然后將雙眼移向顯微鏡目鏡，從目鏡觀察的同時，慢慢向相反方向轉動粗調器(降低載物臺或升高鏡筒)。當模糊的物體圖像出現時，切換到微調器并轉動它，直到物體圖像清晰。

d、觀察后，應先改進鏡筒，并將油鏡擰到一邊，然后取出標本。使用完油鏡后，立即用鏡紙擦去鏡片上的油。如果顯微鏡鏡片上的鏡油粘稠干燥，可以用少許二甲苯蘸鏡紙擦拭鏡片，然后用干燥的鏡紙擦去殘留的二甲苯，避免二甲苯滲入溶解固定鏡片的膠體，導致鏡片移位或脫落。